CRABP-I Lentiviral Activation Particles (h2): sc-405485-LAC-2

ヒトCRABP1は細胞内レチノイン酸結合タンパク質1（CRABP-I）をコードしており、細胞質に存在する高親和性のキャリアとして、細胞内レチノイン酸（RA）の利用可能性と緩衝（バッファリング）を調節し、レチノイド濃度勾配の動態や下流のレチノイン酸受容体シグナル伝達を形作る。レチノイドの分配と代謝を制御することで、CRABP-Iは細胞分化、増殖、発生におけるパターニングに関連する転写プログラムに影響し、神経機能や炎症性シグナル伝達などの過程とも相互に関与する。CRABP1発現やレチノイドの取り扱いの変化は、がん生物学、神経発達および神経変性の表現型、代謝調節異常に関連する文脈で報告されており、機序解明研究における有用な結節点となる。CRABP1の遺伝子編集は、レチノイド輸送やRA応答性遺伝子ネットワークの経路解析を支援し、細胞モデルにおける標的摂動実験を可能にして、表現型の帰結と制御回路を評価できるようにする。

CRABP-I レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCRABP1の発現上昇を可能にします。

CRABP-I レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CRABP1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CRABP-Iの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCRABP1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。