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Cofilin 1双切口酶质粒(h) | sc-400394-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cofilin 1双切口酶质粒(h2) | sc-400394-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CFL1 编码人源 cofilin 1,是一种关键的肌动蛋白结合蛋白,可加速肌动蛋白丝的切断与去聚合,从而维持肌动蛋白的快速周转。Cofilin 1 通过将细胞骨架重塑与来自 Rho 家族 GTP 酶以及 LIMK、TESK 等激酶的上游信号相耦联,帮助协调片状伪足(lamellipodia)动力学、内吞作用、胞质分裂和细胞极性。CFL1 的活性受其磷酸化状态及与磷脂酰肌醇类分子的相互作用严格调控,从而将肌动蛋白重组与信号传导和膜运输联系起来。文献报道指出,涉及 CFL1 的肌动蛋白动力学失调与细胞迁移和侵袭表型改变有关,并与神经元过程及应激反应等相关,这些过程涉及多个疾病研究领域。
Cofilin 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CFL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CFL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CFL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CFL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。