CNOT6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-406273-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNOT6O plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CNOT6 (h2) e o Plasmídeo Double Nickase CNOT6 (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CNOT6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CNOT6 Anticorpo (2193C2a): sc-81231
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNOT6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano CNOT6 codifica a subunidade 6 do complexo CCR4-NOT, uma deadenilase citoplasmática que encurta as caudas poli(A) de mRNAs para promover a desestabilização dos transcritos e a repressão translacional, moldando assim programas de expressão gênica a jusante de proteínas ligantes de RNA e do silenciamento mediado por microRNAs. Como componente catalítico do complexo CCR4-NOT, o CNOT6 contribui para o controle pós-transcricional da progressão do ciclo celular, da diferenciação e das respostas ao estresse por meio da renovação regulada de mRNAs e de interações com a maquinaria de remoção do “cap” e de degradação. A atividade desregulada de CNOT6 e a homeostase de RNA dependente de CCR4-NOT têm sido associadas a sinalização proliferativa alterada e a padrões de expressão de genes relacionados ao sistema imune observados em diversos cânceres e contextos inflamatórios. A edição gênica ou a perturbação de CNOT6 dá suporte a estudos mecanísticos da cinética de degradação de mRNA, da dinâmica das caudas poli(A) e dos efeitos em nível de vias sobre a estabilidade do transcriptoma em modelos celulares humanos.
CNOT6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CNOT6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CNOT6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CNOT6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CNOT6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.