非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CNK1CRISPR激活质粒(h): sc-403355-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CNK1 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- CNK1 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 CNK1 CRISPR 激活质粒 (h) 和 CNK1 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 CNKSR1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CNK1: sc-514607，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CNK1CRISPR激活质粒(h) | sc-403355-ACT | 20 µg | $397.00 |
CNKSR1 编码 CNK1，这是一种多结构域的支架蛋白，可协调从受体酪氨酸激酶到 RAS–RAF–MEK–ERK 级联反应及其他 MAPK 依赖性程序的信号传递。通过组织包含 RAF 激酶、RAS 通路调控因子以及细胞骨架组分的复合物，CNK1 影响细胞增殖、分化和细胞形态，并可调节与 PI3K/AKT 信号的串扰。研究表明，CNK1 的功能与对致癌性 RAS 信号的情境依赖性调控相关，在多种癌症模型中均有其表达变化或通路耦联改变的报道。这些特性使 CNKSR1 成为解析人类细胞中通路布线、反馈调控以及支架蛋白介导的信号特异性的一个有用节点。
CNK1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CNKSR1的表达。
CNK1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CNKSR1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CNKSR1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性CNK1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CNKSR1位点，并能够研究内源性位点上依赖于CNK1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CNKSR1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CNK1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。