CLIP-170 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425158-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLIP-170O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLIP-170 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CLIP-170 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Clip1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLIP-170 Anticorpo (F-3): sc-28325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLIP-170 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425158-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLIP-170 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425158-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Clip1 codifica a CLIP-170, uma proteína rastreadora da extremidade positiva dos microtúbulos que se liga a proteínas de ligação às extremidades e conecta microtúbulos dinâmicos a fatores corticais e associados a organelas. A CLIP-170 regula a polimerização de microtúbulos, a captura de cinetócoros e o tráfego vesicular dependente de microtúbulos, influenciando a polaridade celular, a migração e a progressão mitótica. Ao coordenar o remodelamento do citoesqueleto e o transporte intracelular, a CLIP-170 ajuda a moldar saídas de sinalização que dependem da organização espacial, incluindo vias que controlam a adesão e a fidelidade do checkpoint do fuso. A desregulação da dinâmica dos microtúbulos e de processos associados ao tráfego é amplamente relevante para fenótipos proliferativos e do neurodesenvolvimento, tornando Clip1 um alvo útil para estudos mecanísticos do controle do citoesqueleto.
CLIP-170 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Clip1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Clip1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Clip1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Clip1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.