Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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citrate synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402227-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- citrate synthaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase citrate synthase (h) e o Plasmídeo Double Nickase citrate synthase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:citrate synthase Anticorpo (G-3): sc-390693
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
citrate synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402227-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
citrate synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402227-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A CS humana codifica a citrato sintase, uma enzima da matriz mitocondrial que catalisa a condensação de oxaloacetato e acetil‑CoA para formar citrato, iniciando o fluxo pelo ciclo do ácido tricarboxílico (TCA). Ao controlar a entrada no metabolismo oxidativo, a citrato sintase sustenta a produção de NADH/FADH2 para a cadeia de transporte de elétrons e influencia a anaplerose/cataplerose que conecta o metabolismo de carboidratos, lipídios e aminoácidos. A atividade de CS se cruza com a bioenergética mitocondrial, a homeostase redox e processos biossintéticos dependentes de citrato, como a síntese de ácidos graxos e de esteróis. Alterações no metabolismo mitocondrial envolvendo a função do ciclo TCA são frequentemente investigadas em contextos como desregulação metabólica, neurodegeneração e fenótipos proliferativos, nos quais a capacidade mitocondrial e a utilização de substratos são remodeladas.
citrate synthase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.