CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404017-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CHD7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CHD7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CHD7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHD7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CHD7 Anticorpo (F-11): sc-390742
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD7 (proteína 7 de ligação ao DNA com helicase de cromodomínio) é um remodelador de cromatina dependente de ATP que reconhece marcas de histonas por meio de cromodomínios e regula o posicionamento de nucleossomos para controlar programas de expressão gênica durante o desenvolvimento. Atua na regulação transcricional e na atividade de enhancers, interagindo com vias epigenéticas que coordenam a especificação da crista neural, a organogênese e decisões de destino celular. A disfunção de CHD7 está associada a distúrbios congênitos do desenvolvimento, sobretudo à síndrome de CHARGE, e alterações na atividade de CHD7 têm sido estudadas no contexto da biologia tumoral e de estados de diferenciação. Essas características fazem de CHD7 um alvo útil para investigar a dinâmica da cromatina, o comprometimento de linhagem e redes transcricionais associadas a doenças em células humanas.
CHD7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHD7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHD7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHD7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHD7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.