Plasmide Double Nickase (h) CHD7: sc-404017-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CHD7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CHD7 Double Nickase (h) et le plasmide CHD7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CHD7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CHD7 Antibody (F-11): sc-390742
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CHD7 | sc-404017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CHD7 | sc-404017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD7 (chromodomain helicase DNA-binding protein 7) est un remodeleur de la chromatine dépendant de l’ATP qui reconnaît les marques histoniques via des chromodomaines et régule le positionnement des nucléosomes afin de contrôler les programmes d’expression génique au cours du développement. Il intervient dans la régulation transcriptionnelle et l’activité des enhancers, en interaction avec des voies épigénétiques qui coordonnent la spécification des crêtes neurales, l’organogenèse et les décisions de destin cellulaire. Une altération de CHD7 est associée à des troubles congénitaux du développement, en particulier le syndrome CHARGE, et une activité modifiée de CHD7 a été étudiée dans le contexte de la biologie tumorale et des états de différenciation. Ces caractéristiques font de CHD7 une cible utile pour explorer la dynamique de la chromatine, l’engagement de lignée et les réseaux transcriptionnels associés aux maladies dans les cellules humaines.
CHD7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CHD7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CHD7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CHD7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CHD7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.