Plasmide Double Nickase (h) CHAC1: sc-403197-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CHAC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CHAC1 Double Nickase (h) et le plasmide CHAC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CHAC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CHAC1 | sc-403197-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CHAC1 | sc-403197-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHAC1 (ChaC glutathione specific gamma-glutamylcyclotransferase 1) code une enzyme cytosolique qui dégrade le glutathion, influençant ainsi l’homéostasie redox et la susceptibilité cellulaire au stress oxydatif. Son expression transcriptionnelle est induite par la réponse intégrée au stress, notamment via la signalisation ATF4/CHOP en aval du stress du réticulum endoplasmique et de la limitation en acides aminés. En modulant les réserves de glutathion, CHAC1 interfère avec des voies qui contrôlent la peroxydation lipidique, la fonction mitochondriale et les décisions de destinée cellulaire adaptatives au stress. Une expression dérégulée de CHAC1 a été associée à des affections caractérisées par un déséquilibre de la protéostase et des lésions oxydatives, ce qui étaye sa pertinence pour des études mécanistiques de physiopathologies liées au stress.
CHAC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CHAC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CHAC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CHAC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CHAC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.