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CENP-C双切口酶质粒(h) | sc-403000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CENP-C双切口酶质粒(h2) | sc-403000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CENPC 编码着丝粒蛋白 C(CENP-C)。CENP-C 是内层动粒的核心组成部分,可与着丝粒染色质结合,并帮助组织稳定微管附着所必需的“构成型着丝粒相关网络”(constitutive centromere-associated network, CCAN)。CENP-C 协调动粒组装与纺锤体检查点信号传导,确保有丝分裂过程中染色体准确排列并实现正确分离,从而将着丝粒身份与细胞周期进程连接起来。CENP-C 依赖的动粒结构一旦受损,会导致染色体错误分离和非整倍体;这些过程常与增殖性疾病中的基因组不稳定性相关。因此,CENP-C 在着丝粒生物学、有丝分裂保真性,以及染色质组织与染色体遗传相耦联的机制研究中备受关注。
CENP-C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CENPC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CENPC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CENPC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CENPC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。