Cdx2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-419618-LAC

Mouse Cdx2 (caudaler Homeobox-Typ 2) kodiert einen Homeobox-Transkriptionsfaktor, der während der frühen Entwicklung die anterior–posteriore Musterbildung und die Spezifizierung epithelialer Zelllinien koordiniert. CDX2 reguliert Gen-Netzwerke, die Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Differenzierung steuern, und spielt eine zentrale Rolle bei der Reifung des intestinalen Epithels sowie der Aufrechterhaltung barriereassoziierter Programme. Als transkriptioneller Regulator integriert es entwicklungsbiologische Signale und formt chromatinabhängige Transkriptionszustände, die die Gewebeidentität beeinflussen. Eine fehlregulierte CDX2-Expression und veränderte nachgeschaltete Transkriptionsprogramme werden in Studien zur gastrointestinalen Biologie, epithelialen Plastizität und krebsassoziierten Differenzierungszuständen häufig als mechanistische Readouts verwendet.

Cdx2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cdx2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Cdx2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cdx2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Cdx2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cdx2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.