Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cdt1双切口酶质粒(h): sc-401014-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cdt1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cdt1双切酶质粒（h）和Cdt1双切酶质粒（h2）编码针对CDT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cdt1: sc-365305，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cdt1双切口酶质粒(h) | sc-401014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdt1双切口酶质粒(h2) | sc-401014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类基因 CDT1 编码 Cdt1，这是一种必需的复制许可因子，在有丝分裂晚期和 G1 期将 MCM2–7 解旋酶装载到染色质上，建立复制前复合物（pre-RC），从而确保 DNA 在每个细胞周期只复制一次。Cdt1 的活性受到严格调控，包括依赖 CDK 的磷酸化以及通过 SCF 和 CRL4–DDB1–Cdt2 通路介导的泛素化蛋白水解，使复制起始位点的许可与检查点信号及染色质环境相整合。CDT1 表达失调或蛋白稳定性增加会促进再复制，引发复制压力和 DNA 损伤应答，因此 Cdt1 与基因组不稳定性表型密切相关，常见于癌症生物学及其他增殖性疾病研究中。作为 S 期进入调控网络中的关键节点，Cdt1 常与 geminin（GMNN）、ORC 复合体组分以及 ATR/CHK1 通路一起被研究，用于解析复制时序与细胞周期进程。
Cdt1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CDT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CDT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CDT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。