Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
p27 Kip1 Antibody (0.N.491): sc-71813. Western blot analysis of p27 Kip1 expression in HeLa (A), BYDP (B) and WEHI-231 (C) whole cell lysates.
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CDKN1B/Kip1 p27双切口酶质粒(m): sc-419608-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CDKN1B/Kip1 p27 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CDKN1B/Kip1 p27双切酶质粒（m）和CDKN1B/Kip1 p27双切酶质粒（m2）编码针对Cdkn1b的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CDKN1B/Kip1 p27: sc-1641，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CDKN1B/Kip1 p27双切口酶质粒(m) | sc-419608-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cdkn1b 编码细胞周期依赖性激酶抑制因子 p27^Kip1（CDKN1B），它是细胞周期进程的关键负调控因子，可抑制 CDK2–Cyclin E/A 的活性，并有助于维持 G1/S 检查点。p27 通过包括 PI3K–AKT 信号通路在内的多种途径，将促有丝分裂信号与生长控制相整合；其抑制功能会受到磷酸化依赖的亚细胞定位变化以及蛋白酶体周转的调控。在小鼠研究体系中，Cdkn1b 的剂量变化或调控异常常被用于研究增殖与分化的平衡、组织稳态以及细胞衰老程序。p27 的表达或稳定性失衡在癌症生物学模型中常与异常的细胞周期控制相关，也与发育及再生情境下的过度增殖表型相关。
CDKN1B/Kip1 p27 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cdkn1b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdkn1b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cdkn1b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cdkn1b基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。