Cdk5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400161-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdk5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdk5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdk5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdk5 Anticorpo (J-3): sc-6247
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdk5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A quinase dependente de ciclina 5 (CDK5) codifica a Cdk5, uma quinase de serina/treonina dirigida a prolina, ativada por cofatores não ciclínicos como p35 (CDK5R1) e p39 (CDK5R2). Em células humanas, a Cdk5 regula o desenvolvimento neuronal, a sinalização sináptica, a remodelação do citoesqueleto, o tráfego vesicular e cascatas de fosforilação independentes do ciclo celular por meio de substratos que convergem com as vias MAPK, PI3K/AKT e de resposta ao estresse. A atividade desregulada da Cdk5 e a fosforilação aberrante de seus substratos foram associadas a processos neurodegenerativos, incluindo a patologia da tau, bem como a programas alterados de migração e sobrevivência em múltiplos contextos de doença. Como a CDK5 influencia tanto a dinâmica de sinalização quanto a plasticidade estrutural, ela é amplamente estudada em modelos de neurobiologia, respostas a danos no DNA e comunicação cruzada entre vias mediada por redes de quinases.
Cdk5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.