CD67 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405743-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD67O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD67 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD67 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CEACAM8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD67 Anticorpo (GM2H6): sc-101383
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD67 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD67 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEACAM8 codifica o CD67, um membro associado aos granulócitos da família de moléculas de adesão celular relacionadas ao antígeno carcinoembrionário, que é abundante em neutrófilos humanos e tem sua expressão aumentada durante a ativação. O CD67 participa de interações célula–célula e contribui para a adesão de neutrófilos, respostas associadas à degranulação e modulação da sinalização inflamatória no sistema imune inato. Por meio de seu papel no tráfego de leucócitos e na função efetora, o CEACAM8 é frequentemente estudado em vias relacionadas à imunidade de mucosas, defesa antimicrobiana e inflamação mediada por citocinas. Padrões de expressão alterados em células mieloides e em tecidos inflamados fizeram do CEACAM8 um marcador útil de pesquisa em estudos de doenças inflamatórias e de infiltração imune associada a tumores.
CD67 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CEACAM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CEACAM8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CEACAM8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CEACAM8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.