CD52 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403151-ACT

CD52は、リンパ球や単球を含む多くの造血系細胞の表面に高密度に発現する、小型のグリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型糖タンパク質をコードする。膜へのアンカー結合と脂質ミクロドメインへの局在を介して、CD52は細胞間相互作用に関与し、白血球機能に関連する免疫細胞の活性化状態やシグナル伝達過程に影響を及ぼし得る。CD52の発現は免疫細胞サブセットの定義や、免疫恒常性および炎症応答を制御する機構の研究に広く用いられている。免疫介在性疾患や血液悪性腫瘍のさまざまな病態においてCD52発現パターンの変化が報告されており、疾患文脈での免疫調節を検討する上での重要性が示唆される。

CD52 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性CD52の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CD52 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における CD52 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はCD52転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD52の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のCD52遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD52依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびCD52発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD52経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。