CD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402309-NIC

CD5 é uma glicoproteína transmembrana do tipo I expressa principalmente em linfócitos T e em um subconjunto de células B, na qual atua como um receptor imunomodulador que ajusta os limiares de sinalização dos receptores de antígeno. Por meio de interações com componentes do complexo TCR/CD3 e com fosfatases e adaptadores associados, o CD5 contribui para a regulação de cascatas proximais de tirosina quinases, do fluxo de cálcio e de programas transcricionais a jusante que governam ativação, anergia e sobrevivência. A sinalização mediada por CD5 influencia a seleção de timócitos e a tolerância periférica, moldando a homeostase imune durante respostas inflamatórias. A expressão ou função desregulada de CD5 tem sido associada a estados alterados de ativação de linfócitos na autoimunidade e a redes de sinalização aberrantes em neoplasias de células B, sustentando seu uso como marcador e como nó mecanístico em pesquisas de imunologia.

CD5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD5 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.