CD38 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401117-LAC

O CD38 humano codifica uma ectoenzima e receptor transmembranar do tipo II que catalisa o metabolismo do NAD+ para gerar segundos mensageiros como o ADP-ribose cíclico e a ADP-ribose, regulando assim a mobilização intracelular de Ca2+. A atividade do CD38 integra o estado metabólico a processos de sinalização que influenciam a ativação, a diferenciação e a adesão de linfócitos, bem como respostas de citocinas, com funções adicionais no equilíbrio redox celular por meio de vias dependentes de NAD+. O CD38 é altamente expresso em subpopulações de células imunes e é frequentemente estudado no contexto do imunometabolismo, da sinalização inflamatória e das interações entre tumor e sistema imune. A expressão desregulada ou a função enzimática alterada do CD38 tem sido associada a mudanças na homeostase imune e na sinalização do microambiente em neoplasias hematológicas e outras doenças nas quais o consumo de NAD+ e a sinalização dependente de Ca2+ estão perturbados.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD38 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CD38 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD38 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CD38, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD38. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CD38 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.