CD300E Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-415572-LAC

CD300E (também conhecido como IREM-2) codifica um recetor da superfamília das imunoglobulinas, expresso principalmente em células da linhagem mieloide, onde modula a ativação imunitária inata e a sinalização inflamatória. A ativação de CD300E pode acoplar-se a vias dependentes de adaptadores que promovem programas de ativação celular, incluindo produção de citocinas, respostas fagocíticas e maturação de células apresentadoras de antigénio, cruzando-se com processos associados a NF-κB e MAPK. A regulação alterada da sinalização de recetores mieloides é relevante para estados de desregulação imunitária e para a biologia de doenças inflamatórias, e os padrões de expressão de CD300E são frequentemente avaliados em estudos de ativação de leucócitos e de microambientes imunitários teciduais. Como imunorrecetor de superfície celular, o CD300E também é útil para analisar como redes de recetores ativadores moldam a polarização funcional de macrófagos e células dendríticas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD300E (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CD300E numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD300E (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CD300E, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD300E. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CD300E e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.