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CD20慢病毒激活颗粒(h) | sc-416765-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
CD20慢病毒激活颗粒(h2) | sc-416765-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
MS4A1 编码 CD20,这是一种四跨膜蛋白,在 B 系细胞中高表达,可调控钙离子通量以及依赖 B 细胞受体(BCR)的信号传导。CD20 通过与 PI3K–AKT、NF-κB 和 MAPK 等信号通路相交的途径,并通过调节抗原驱动的应答,促进 B 细胞的激活、增殖与分化。MS4A1/CD20 表达的改变与 B 细胞谱系身份以及免疫微环境状态密切相关,因此在 B 细胞恶性肿瘤模型和与自身免疫相关的 B 细胞失调研究中,常被作为一种共同的分子特征加以考察。由此,MS4A1 成为在人源细胞系统中解析 B 细胞信号网络、谱系转换以及免疫表型异质性的一个有用关键节点。
CD20 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MS4A1 表达。
CD20 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MS4A1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CD20表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MS4A1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。