Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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CD151 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401969
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD151 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CD151, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD151 Antibody (H-8): sc-271216
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD151 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401969 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CD151 (tetraspanina-24) è una tetraspanina a quattro domini transmembrana che organizza microdomini arricchiti in tetraspanine e funge da impalcatura per complessi di adesione e di segnalazione sulla membrana plasmatica. Interagendo con integrine leganti la laminina come ITGA3/ITGB1 e ITGA6/ITGB4, CD151 regola l’adesione cellula–matrice, lo spreading e la motilità, e modula la segnalazione a valle attraverso vie legate alle adesioni focali e al rimodellamento del citoscheletro. CD151 influenza anche il trafficking di membrana e la biologia degli esosomi, modellando la distribuzione dei recettori e la propagazione dei segnali. Un’espressione o una funzione deregolata di CD151 è stata associata ad alterazioni dell’integrità epiteliale e a fenotipi invasivi nella biologia del cancro, oltre che alla fisiopatologia renale e vascolare, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD151 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CD151 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CD151 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CD151 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD151.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CD151 per lo studio della segnalazione di CD151, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CD151 critici per la funzione di CD151
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CD151 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CD151 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CD151 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CD151. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CD151 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CD151 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CD151 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CD151 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.