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CD137慢病毒激活颗粒(m) | sc-423447-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
CD137慢病毒激活颗粒(m2) | sc-423447-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Tnfrsf9 基因编码 CD137(4-1BB),这是一种可诱导的 TNF 受体超家族共刺激分子,表达于活化的 T 细胞、NK 细胞及其他免疫细胞亚群上。CD137 被结合/激活后,可通过招募衔接蛋白并启动下游 NF-κB 与 MAPK 信号通路,促进细胞存活、增殖与效应功能,从而支持持续的免疫激活。在小鼠模型中,CD137 活性会影响 T 细胞启动(priming)、记忆形成以及塑造免疫稳态的炎性细胞因子程序。CD137 信号失衡在慢性炎症、自身免疫、感染和肿瘤免疫等背景下被广泛研究,被认为是调控免疫激活阈值的重要因素。
CD137 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Tnfrsf9 表达。
CD137 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Tnfrsf9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CD137表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Tnfrsf9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。