CD137 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405068-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD137O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD137 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD137 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFRSF9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD137 Anticorpo (BBK-2): sc-58947
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD137 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD137 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF9 (CD137, 4-1BB) é um membro induzível da superfamília de receptores de TNF, expresso em células T ativadas, células NK e outros subconjuntos imunitários, onde atua como um checkpoint coestimulatório que controla a ativação, a sobrevivência e a diferenciação efetora. A ligação do CD137 ao seu ligante desencadeia o recrutamento de adaptadores e a sinalização a jusante por NF-κB, MAPK e PI3K/AKT, sustentando a produção de citocinas, a proliferação e a aptidão metabólica. Esta via molda as interações entre células imunitárias em tecidos inflamados e no microambiente tumoral, sendo frequentemente estudada no contexto de inflamação crónica, autoimunidade e imunobiologia do cancro. Alterações na expressão de TNFRSF9 ou na dinâmica da sua sinalização podem modular respostas citotóxicas e estados de exaustão imunitária, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos da regulação imunitária.
CD137 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFRSF9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFRSF9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFRSF9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFRSF9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.