CD130/gp130 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400301-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD130/gp130O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD130/gp130 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD130/gp130 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IL6ST. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD130/gp130 Anticorpo (E-8): sc-376280
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD130/gp130 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400301-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD130/gp130 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400301-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL6ST codifica CD130/gp130, a subunidade compartilhada de transdução de sinal dos receptores de citocinas da família IL-6, que acopla a ligação do ligante a cascatas de quinases intracelulares. Após a formação do complexo receptor, a gp130 ativa quinases JAK e, a jusante, STAT3/STAT1, e também pode engajar as vias MAPK/ERK e PI3K–AKT para regular programas de transcrição que controlam inflamação, diferenciação, sobrevivência e respostas de fase aguda. Como nó central na sinalização por citocinas, alterações na sinalização dependente de IL6ST estão associadas à desregulação da homeostase imune e têm sido estudadas em contextos que incluem estados inflamatórios crônicos e ativação oncogênica da via STAT3. Essas propriedades tornam a gp130 um alvo frequente em estudos mecanísticos de responsividade a citocinas, reprogramação transcricional e crosstalk entre vias em células humanas.
CD130/gp130 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL6ST em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL6ST. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL6ST. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL6ST interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.