caveolin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419479-NIC

O gene Cav1 de camundongo codifica a caveolina-1, um componente estrutural principal das cavéolas, que serve de arcabouço para microdomínios de membrana e coordena a transdução de sinais na membrana plasmática. A caveolina-1 modula a endocitose e a mecanotransdução, influencia a homeostase do colesterol e o tráfego de lipídios, e molda as respostas de sinalização de vias como quinases da família Src, sinalização eNOS/NO, TGF-β e a dinâmica de adesões focais dependentes de integrinas. Por meio dessas funções, Cav1 afeta a remodelação do citoesqueleto, a migração celular e as interações com a matriz extracelular, aspectos comumente investigados em biologia vascular, modelos de fibrose e estudos do microambiente tumoral. Alterações na expressão ou na localização da caveolina-1 têm sido associadas a disfunção endotelial, fenótipos adiposos e metabólicos, e mudanças dependentes do contexto na proliferação e invasão em cenários de pesquisa em câncer.

caveolin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cav1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cav1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cav1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cav1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.