Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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caspase-7 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401301-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- caspase-7 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- caspase-7ダブルニカースプラスミド（h）およびcaspase-7ダブルニカースプラスミド（h2）は、CASP7を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: caspase-7 p10 抗体 (B-3): sc-365034
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
caspase-7 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401301-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-7 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401301-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASP7はカスパーゼ7をコードしており、カスパーゼ7は内因性および外因性のアポトーシスシグナル伝達において、開始カスパーゼの下流で活性化される実行（エフェクター）型のシステイン‐アスパラギン酸プロテアーゼです。プロセシングを受けて活性化すると、カスパーゼ7は幅広い基質を切断し、クロマチン凝縮、細胞骨格の再編成、細胞の秩序だった解体を促進し、カスパーゼ3と協調して機能します。CASP7の活性は、ミトコンドリアのストレス応答、デスレセプター経路、さらにアポトーシス性のプロテオリシスが組織恒常性を形作る炎症環境とも接点を持ちます。カスパーゼ7シグナルの破綻は、がん、神経変性、免疫関連疾患にまたがって観察される細胞死閾値の変化と関連しており、アポトーシスの機構研究における有用な解析ノードとなっています。
caspase-7 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CASP7 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CASP7内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CASP7の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CASP7が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。