Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Calpain reg Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403478-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Calpain regO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Calpain reg (h) e o Plasmídeo Double Nickase Calpain reg (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CAPNS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Calpain reg Anticorpo (P-1): sc-32325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Calpain reg Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403478-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calpain reg Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403478-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAPNS1 codifica a pequena subunidade regulatória necessária para a estabilidade e a atividade dos complexos de protease cisteína calpaína-1 e calpaína-2, ubíquos. A sinalização por calpaínas medeia uma proteólise limitada de proteínas do citoesqueleto e de sinalização, moldando a renovação das adesões focais, a dinâmica de membrana e a remodelação dependente de cálcio durante a migração celular, a progressão do ciclo celular e a apoptose. Por meio da clivagem de substratos envolvidos nas vias de NF-κB, MAPK e associadas a integrinas, CAPNS1 pode influenciar a sinalização inflamatória e as respostas ao estresse. A atividade desregulada de calpaínas tem sido associada à invasividade de células cancerígenas, à neurodegeneração e à fisiopatologia cardiovascular e metabólica, tornando CAPNS1 um nó útil para estudos mecanísticos de proteostase e de redes de sinalização acionadas por cálcio.
Calpain reg O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CAPNS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CAPNS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CAPNS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CAPNS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.