Calpain 6 Double Nickaseプラスミド (m): sc-419444-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Calpain 6 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Calpain 6ダブルニカースプラスミド（m）およびCalpain 6ダブルニカースプラスミド（m2）は、Capn6を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Calpain 6 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-419444-NIC | 20 µg | $410.00 |
マウスCapn6は、カルパイン6（CAPN6）をコードしています。CAPN6はカルパインファミリーに属する非典型的なメンバーで、主要な触媒活性は欠く一方、細胞骨格における制御的な足場（スキャフォールド）としての役割を保持しています。CAPN6は微小管の安定性、アクチンのリモデリング、細胞運動性に影響を与え、細胞骨格ダイナミクス、小胞輸送、細胞分化プログラムを制御する経路と関連します。発生過程の組織や筋形成の文脈では、CAPN6は増殖と分化状態の制御に関与するとされ、組織の形態形成や修復に関する研究で重要です。CAPN6発現の変化は、疾患に関連したリモデリング表現型で報告されており、臨床的な転帰を示唆するものではないものの、線維化、がん細胞の浸潤、神経筋または発生異常のモデルにおける検討を支持します。
Calpain 6 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Capn6 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Capn6内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Capn6の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Capn6が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。