Particules Lentivirales d'Activation (m) cadherin-26: sc-436285-LAC

Cdh26 code la cadhérine‑26, un récepteur d’adhésion cellule–cellule dépendant du calcium appartenant à la superfamille des cadhérines, qui contribue à l’organisation épithéliale, à l’intégrité des jonctions et aux propriétés de barrière spécifiques des tissus chez la souris. En médiant une adhésion homophilique et en se reliant au cytosquelette d’actine via des complexes associés aux caténines, la cadhérine‑26 peut influencer la signalisation dépendante du contact, la polarité cellulaire et des processus de remodelage pertinents pour l’inflammation et l’homéostasie tissulaire. Une expression dysrégulée des cadhérines et des perturbations jonctionnelles sont fréquemment associées à une différenciation épithéliale altérée et à des interactions avec les cellules immunitaires, ce qui fait de Cdh26 un point d’entrée utile pour étudier la régulation dépendante de l’adhésion en biologie des muqueuses et des voies aériennes. Ces mécanismes sont souvent explorés dans des modèles de phénotypes inflammatoires et de remodelage, où la cohésion épithéliale et la communication croisée des signaux influencent des voies pertinentes pour la maladie.

Les particules d'activation lentivirales cadherin-26 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Cdh26 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales cadherin-26 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Cdh26, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de cadherin-26. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Cdh26 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.