C15orf27 Double Nickaseプラスミド (h): sc-414201-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- C15orf27 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- C15orf27ダブルニカースプラスミド（h）およびC15orf27ダブルニカースプラスミド（h2）は、TMEM266を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
C15orf27 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-414201-NIC | 20 µg | $410.00 |
TMEM266（C15orf27としても注釈される）は、複数回膜貫通型と予測される膜タンパク質をコードしますが、ヒト細胞における機能的特徴づけは限定的です。発現パターンや配列上の特徴から、タンパク質輸送、オルガネラ間コミュニケーション、受容体連関シグナルの制御といった膜関連プロセスに関与し、細胞恒常性に影響を及ぼす可能性が示唆されています。注釈が十分でない遺伝子であるため、TMEM266は経路のつながりや状況依存的な細胞表現型を明らかにする目的で、トランスクリプトーム解析や機能ゲノミクス研究において優先的に解析対象として取り上げられることが多いです。機能未解明の膜貫通タンパク質の発現異常は、疾患関連モデルにおけるシグナル状態の変化を反映する分子指標となり得ますが、臨床的解釈というよりは機序解明研究を支えるものです。
C15orf27 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における TMEM266 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、TMEM266内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、TMEM266の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、TMEM266が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。