BVES Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403698-NIC

BVES (substância epicárdica de vasos sanguíneos), também conhecido como POPDC1, codifica uma proteína associada à membrana, enriquecida em tecidos epiteliais e musculares, que contribui para a adesão célula–célula, a organização de membrana e a regulação de microdomínios de sinalização. O BVES participa de processos responsivos a nucleotídeos cíclicos e interage com vias que controlam a dinâmica do citoesqueleto, a integridade das junções estreitas e a polarização epitelial, influenciando a motilidade celular e a arquitetura tecidual. Alterações na expressão ou na localização do BVES têm sido associadas à desregulação da homeostase epitelial e a mudanças nos fenótipos proliferativos e migratórios, tornando-o relevante para estudos de biologia tumoral e remodelamento tecidual. Em contextos cardiovasculares e de músculo liso, o BVES tem sido relacionado à sinalização responsiva ao estresse e a aspectos fisiológicos ligados à condução, apoiando seu uso em modelos de desenvolvimento e função muscular.

BVES O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BVES em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BVES. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BVES. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BVES interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.