Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BTEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419372-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BTEB2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BTEB2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase BTEB2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Klf5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BTEB2 Anticorpo (G-7): sc-398470
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BTEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419372-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BTEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419372-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Klf5 de camundongo codifica o fator de transcrição BTEB2 (fator semelhante a Krüppel 5), uma proteína de ligação ao DNA do tipo “zinc finger” que regula programas de proliferação e diferenciação em linhagens epiteliais e mesenquimais. O BTEB2 integra sinais das vias MAPK/ERK, Wnt/β-catenina, TGF-β e PI3K/AKT para controlar a progressão do ciclo celular, a migração e o remodelamento da matriz extracelular. No desenvolvimento e na homeostase tecidual, a atividade de Klf5 influencia a dinâmica das criptas intestinais, fenótipos vasculares e de músculo liso e epitélios formadores de barreira por meio de redes transcricionais dependentes do contexto. A expressão desregulada de Klf5/BTEB2 tem sido associada a remodelamento inflamatório, fibrose e estados transcricionais oncogênicos, tornando-o um ponto útil para estudos mecanísticos do controle de crescimento e da plasticidade de linhagem.
BTEB2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Klf5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Klf5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Klf5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Klf5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.