Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Brk Antibody (G-6) HRP: sc-166171 HRP. Direct western blot analysis of Brk expression in ZR-75-1 (A) and SW480 (B) whole cell lysates.
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Brk双切口酶质粒(h): sc-401127-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Brk 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Brk双切酶质粒（h）和Brk双切酶质粒（h2）编码针对PTK6的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Brk: sc-166171，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Brk双切口酶质粒(h) | sc-401127-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Brk双切口酶质粒(h2) | sc-401127-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTK6 编码非受体型酪氨酸激酶 Brk，这是一种与 Src 相关的信号酶，可通过调控依赖磷酸化的机制来控制细胞增殖、分化以及上皮细胞存活。Brk 整合来自受体酪氨酸激酶和细胞内衔接蛋白的信号线索，影响 EGFR/HER 家族信号、PI3K–AKT 和 MAPK/ERK 等通路，并进一步作用于细胞骨架动态变化与细胞运动性。在人体组织中，PTK6 的表达与活性常在上皮生物学与致癌信号研究背景下被关注；Brk 依赖的磷酸化网络发生改变与生长因子反应性变化及侵袭性表型相关。这些特点使 PTK6 成为在疾病相关模型中解析激酶驱动的信号回路以及磷酸化蛋白组通路“重布线”的有用靶点。
Brk 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PTK6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PTK6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PTK6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PTK6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。