Bok CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407699

개요

BOK(BCL2-related ovarian killer)는 BCL-2 단백질 계열에 속하는 친(親)아폽토시스 단백질인 Bok을 암호화하며, 미토콘드리아 외막의 투과성 증가(mitochondrial outer membrane permeabilization, MOMP)와 그 하류의 카스파아제 활성화를 조절함으로써 내인성 아폽토시스에 기여합니다. Bok은 소포체(ER) 및 미토콘드리아-연관 막(mitochondria-associated membranes, MAM) 생물학과의 연관성이 보고되어 왔고, 단백질 항상성(proteostasis)과 세포 운명 결정을 통합하는 스트레스 반응 경로와도 교차합니다. 이러한 역할을 바탕으로 BOK는 아폽토시스 역치와 세포의 스트레스 민감도가 변하는 상황에서 연구되며, 여기에는 암 생물학, 신경퇴행과 연관된 스트레스 신호전달, 조직 항상성 등이 포함됩니다. 또한 다른 BCL-2 계열 단백질과의 조절 및 기능적 중첩 때문에, 경로의 중복성(pathway redundancy)과 아폽토시스 프라이밍(apoptotic priming)을 분석하는 데 유용한 노드로 활용됩니다.

Bok CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 BOK 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 BOK 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 BOK의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Bok 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Bok 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 BOK 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Bok 기능에 중요한 BOK 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 BOK 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Bok CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Bok CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 BOK 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Bok HDR 플라스미드 (h) 및 Bok HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 BOK 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 BOK 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.