BMP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400514

概要

BMP2は、TGF-βスーパーファミリーに属する分泌性リガンドである骨形成タンパク質2（BMP-2）をコードします。BMP-2は主にI型／II型のセリン／スレオニンキナーゼ受容体を介してシグナルを伝達し、SMAD1/5/8を活性化するとともに、MAPK経路ともクロストークします。BMP-2は、骨芽細胞系および軟骨細胞系への分化、細胞外マトリックスのリモデリング、発生過程のパターン形成を制御し、間葉系系譜における細胞運命決定に広く関与します。BMP2シグナルの異常は、異所性骨化、骨格奇形、さらに増殖・遊走・上皮間葉転換（EMT）プログラムに影響を与える腫瘍微小環境シグナルの変化と関連づけられています。そのためBMP2は、骨生物学、再生研究モデル、およびTGF-β/BMPシグナルを含む経路間クロストーク解析において広く研究されています。

BMP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBMP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMP-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMP-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMP-2の機能に不可欠なBMP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMP-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMP-2 HDRプラスミド（h）および BMP-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。