Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BMAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419206-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BMAL1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BMAL1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase BMAL1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Arntl. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BMAL1 Anticorpo (B-1): sc-365645
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BMAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419206-NIC | 20 µg | $410.00 |
Arntl codifica o principal fator de transcrição circadiano BMAL1, que forma um heterodímero com CLOCK para se ligar a elementos E-box e promover a expressão rítmica de genes controlados pelo relógio. Essa rede de retroalimentação transcrição–tradução coordena oscilações celulares no metabolismo, na homeostase redox, nas respostas a danos no DNA e na sinalização imune entre diferentes tecidos. A atividade de BMAL1 interage com vias que incluem a repressão por PER/CRY, os circuitos de receptores nucleares REV-ERB/ROR e programas de sensoriamento de nutrientes que ajustam a função mitocondrial e o uso de lipídios e glicose. A desregulação da sinalização ARNTL/BMAL1 tem sido associada a fenótipos de sono–vigília e comportamentais em sistemas modelo e é frequentemente estudada no contexto de processos metabólicos, inflamatórios, neurodegenerativos e relacionados ao câncer, nos quais o controle circadiano modula programas de expressão gênica relevantes para a doença.
BMAL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Arntl em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Arntl. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Arntl. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Arntl interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.