Blk Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402737-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BlkO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Blk (h) e o Plasmídeo Double Nickase Blk (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BLK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Blk Anticorpo (9D10D1): sc-65980
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Blk Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402737-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Blk Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402737-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BLK codifica a tirosina quinase linfoide B (Blk), uma tirosina quinase não receptora da família Src enriquecida em células B, que acopla a ativação do receptor de células B (BCR) a cascatas de fosforilação a jusante. A Blk participa da sinalização proximal de imunorreceptores e modula vias que controlam o fluxo de cálcio, a ativação de MAPK e programas de sobrevivência e diferenciação dependentes de PI3K. Alterações na expressão ou na atividade de BLK têm sido associadas a desenvolvimento desregulado de células B e sinalização imune aberrante, e associações genéticas implicam BLK na suscetibilidade a doenças autoimunes. Essas propriedades tornam BLK um alvo útil para investigar mecanismos de ativação e tolerância de células B, bem como o redirecionamento de redes de sinalização em modelos imunológicos humanos.
Blk O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BLK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BLK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BLK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BLK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.