BF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402933-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BF-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BF-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BF-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FOXG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BF-1 Anticorpo (D-12): sc-518188
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402933-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402933-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXG1 codifica o fator de transcrição forkhead box BF-1, um regulador-chave do padrão telencefálico, da proliferação de progenitores neuronais e do timing de diferenciação durante o desenvolvimento do cérebro humano. O BF-1 molda programas de expressão gênica que influenciam a neurogênese e a identidade regional por meio de repressão/ativação transcricional, com efeitos a jusante sobre o controle do ciclo celular e vias de especificação de linhagem. A alteração da dosagem ou da função de FOXG1 está fortemente associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, incluindo a síndrome FOXG1 e apresentações mais amplas do espectro do autismo e de encefalopatia epiléptica. Em modelos celulares, a perturbação de FOXG1 é usada para estudar a competência de progenitores corticais, a maturação neuronal e fenótipos de atividade de rede relevantes para transtornos do desenvolvimento.
BF-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FOXG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FOXG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FOXG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FOXG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.