BATF2 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403270-ACT

BATF2（basic leucine zipper ATF-like transcription factor 2）は、インターフェロン誘導性のbZIP型転写因子であり、AP-1ファミリーのメンバーと協働して、自然免疫および炎症シグナル伝達に関連する遺伝子発現プログラムを調節します。サイトカイン／ケモカインネットワークの制御に関与し、免疫細胞や上皮細胞の文脈において分化や活性化状態に影響を与えることがあります。BATF2の活性は、I型／II型インターフェロン下流の経路、パターン認識受容体（PRR）シグナル伝達、ならびにより広範なストレス応答における転写制御の観点から研究されることが一般的です。BATF2発現の異常は、炎症性微小環境の変化や免疫関連表現型の変動と関連しており、感染症モデルやがん生物学の研究において観察されています。

BATF2 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性BATF2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

BATF2 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における BATF2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はBATF2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性BATF2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のBATF2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるBATF2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびBATF2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるBATF2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。