BATF2 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-403270-ACT

BATF2 (fator de transcrição 2 do tipo ATF, com zíper básico de leucina) é um fator de transcrição bZIP induzível por interferon que se associa a membros da família AP-1 para modular programas de expressão gênica ligados à imunidade inata e à sinalização inflamatória. Ele contribui para a regulação de redes de citocinas e quimiocinas e pode influenciar estados de diferenciação e ativação em contextos de células imunes e epiteliais. A atividade de BATF2 é comumente estudada em vias a jusante de interferons tipo I/II, na sinalização de receptores de reconhecimento de padrões e no controle transcricional mais amplo de resposta ao estresse. A desregulação da expressão de BATF2 tem sido associada a microambientes inflamatórios alterados e a fenótipos relacionados ao sistema imune observados em modelos de doenças infecciosas e em pesquisas de biologia do câncer.

BATF2 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de BATF2 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

BATF2 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus BATF2 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição BATF2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de BATF2. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus BATF2 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de BATF2 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via BATF2 em células tumorais com expressão de BATF2 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.