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BAF53双切口酶质粒(h) | sc-403200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BAF53双切口酶质粒(h2) | sc-403200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTL6A 编码 BAF53A,这是一种肌动蛋白相关的亚基,隶属于 ATP 依赖性的 SWI/SNF(BAF)染色质重塑复合物,可调控核小体定位与染色质可及性。通过调节增强子与启动子的调控景观,BAF53A 参与细胞周期进程、谱系决定以及增殖状态维持的转录控制,并与 MYC、E2F 等相关的转录程序发生交叉。ACTL6A/BAF53A 活性的改变已在多种癌症背景中与表观遗传调控失衡以及异常的发育基因表达相关,因此它是研究染色质驱动表型的一个有价值的关键节点。对 ACTL6A 的功能性解析有助于开展机制研究,探讨人类细胞中对染色质重塑的依赖性、转录可塑性以及全基因组调控架构。
BAF53 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ACTL6A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ACTL6A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ACTL6A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ACTL6A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。