Atg16 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-429488-LAC-2

マウスAtg16l1は、マクロオートファジーにおけるオートファゴソーム形成を規定し、新生ファゴフォアでのLC3脂質化を支えるATG12–ATG5–ATG16L1複合体の中核因子であるATG16をコードする。ATG16L1は選択的オートファジーおよび基底オートファジーを統括し、細胞質の品質管理、オルガネラのターンオーバー、抗微生物応答に寄与するとともに、下流で自然免疫シグナル伝達や上皮バリア恒常性にも影響を及ぼす。Atg16l1の遺伝学的・機能的攪乱は炎症性表現型や腸管病変と関連づけられており、オートファジー関連の免疫調節異常をモデル化するための標的として広く用いられている。マウス細胞やin vivo系におけるAtg16l1の遺伝子編集は、関連組織におけるオートファゴソーム生合成の機構、宿主—微生物相互作用、ならびにストレス応答経路の解析を可能にする。

Atg16 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なAtg16l1の発現上昇を可能にします。

Atg16 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Atg16l1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Atg16の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のAtg16l1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。