ATF-5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430721

개요

활성 전사 인자 5(ATF-5)는 마우스 Atf5 유전자에 의해 암호화되는 기본 류신 지퍼(bZIP) 전사인자로, 세포 스트레스 적응, 분화 및 생존을 조절하는 유전자 발현 프로그램을 조정한다. ATF-5는 통합 스트레스 반응(integrated stress response) 신호전달에 관여하며, 상위 단계의 eIF2α/ATF4 관련 신호를 미토콘드리아 기능과 단백질 항상성(proteostasis)에 영향을 미치는 전사적 출력으로 연결할 수 있다. 신경계 및 기타 발달 중인 조직에서 ATF-5는 상황(맥락) 의존적 전사 조절을 통해 계통(lineage) 결정과 증식성 또는 전구세포(progenitor)-유사 상태의 유지와 연관되어 왔다. ATF-5 활성의 조절 이상은 비정상적인 스트레스 내성 및 변화된 세포 생존 경로와 관련이 있는 것으로 보고되어, 질환과 연관된 전사 네트워크 재구성의 기전을 연구하는 데 중요한 표적으로 여겨진다.

ATF-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Atf5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Atf5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Atf5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATF-5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATF-5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Atf5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATF-5 기능에 중요한 Atf5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Atf5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATF-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ATF-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Atf5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATF-5 HDR 플라스미드 (m) 및 ATF-5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Atf5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Atf5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.