Date published: 2026-7-12

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ATAD1双切口酶质粒(h): sc-413720-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • ATAD1 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • ATAD1双切酶质粒(h)和ATAD1双切酶质粒(h2)编码针对ATAD1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    ATAD1双切口酶质粒(h)

    sc-413720-NIC
    20 µg
    $410.00

    ATAD1双切口酶质粒(h2)

    sc-413720-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    ATAD1(ATPase 家族 AAA 结构域含蛋白 1)是一种膜锚定的 AAA+ ATP 酶,主要定位于线粒体外膜。在该处,它通过将误定位或停滞的尾锚定蛋白从膜上抽提出并协调其降解,从而支持蛋白质质量控制。借助 ATP 依赖的重塑作用以及与泛素–蛋白酶体通路的串扰,ATAD1 有助于在蛋白毒性或代谢应激条件下维持线粒体蛋白稳态、细胞器完整性和细胞稳态。ATAD1 依赖的监视机制一旦受损,可能扰乱线粒体动态变化与生物能功能,使该因子与更广泛的应激反应网络相联系,并影响细胞存活与分化。由于线粒体功能障碍是肿瘤生物学和神经退行性表型中的核心特征,ATAD1 活性改变及拷贝数变化也在这些背景下受到研究关注。

    ATAD1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATAD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATAD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATAD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATAD1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。