ASIC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401452-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASIC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASIC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASIC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ASIC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASIC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401452-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASIC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401452-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene ASIC1 humano (canal iônico 1 sensível a ácido, ASIC1) codifica um canal iônico ativado por prótons, permeável a sódio, da família DEG/ENaC, que conecta a acidificação extracelular a uma despolarização rápida da membrana. A atividade do ASIC1 molda a excitabilidade neuronal e a sinalização sináptica e pode influenciar a dinâmica do cálcio intracelular por meio da ativação secundária de canais dependentes de voltagem e da sinalização subsequente por quinases. O canal participa de processos de detecção de pH ligados à acidose associada à isquemia, à transmissão nociceptiva e a microambientes neuroinflamatórios. A desregulação da função ou da expressão de ASIC1 tem sido investigada em contextos como suscetibilidade a AVC, estados de dor crônica e comportamentos relacionados à ansiedade, apoiando sua utilidade como alvo mecanístico em neurobiologia e pesquisa de canais iônicos.
ASIC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ASIC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ASIC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ASIC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ASIC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.