Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Arc Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419184
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Arc Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Arc, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Arc Antibody (C-7): sc-17839
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Arc Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419184 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Arc (proteina associata al citoscheletro regolata dall’attività, activity-regulated cytoskeleton-associated protein) è un gene a risposta immediata indotto dall’attività neuronale ed è essenziale per la plasticità sinaptica alla base dell’apprendimento e della memoria nel topo. Arc regola il traffico endocitico dei recettori del glutammato di tipo AMPA e coordina il rimodellamento del citoscheletro di actina, modulando così la forza sinaptica durante il potenziamento a lungo termine e la depressione a lungo termine. Partecipa inoltre a programmi di espressione genica dipendenti dall’attività e al scaling sinaptico omeostatico che stabilizza l’eccitabilità delle reti neuronali. Una segnalazione di Arc deregolata è stata collegata a fenotipi del neurosviluppo e neuropsichiatrici ed è spesso studiata nel contesto del deterioramento cognitivo e delle alterazioni di rete associate alle crisi epilettiche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Arc (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Arc in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Arc insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Arc a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Arc.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Arc per lo studio della segnalazione di Arc, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Arc critici per la funzione di Arc
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Arc per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Arc CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Arc CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Arc. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Arc Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Arc (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Arc per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Arc definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.