Aquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400340

概要

AQP1はアクアポリン1をコードしており、アクアポリン1は四量体を形成する膜型の水チャネルとして、細胞膜を介した浸透圧依存的な迅速な水輸送を担い、体液恒常性の維持に寄与します。内皮細胞および上皮細胞の文脈では、AQP1は経細胞的な水透過性、細胞容積の調節、ならびにイオン輸送や細胞骨格リモデリングと交差する微小環境動態に影響を与えます。AQP1の発現量や局在の変化は、血管生物学、浮腫に関連する過程、腫瘍関連の血管新生や細胞運動性の表現型と関連づけられてきました。操作性の高い膜チャネルとして、AQP1は水フラックスをバリア機能、遊走、ストレス応答と結び付けて理解するための研究対象として広く用いられています。

Aquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAQP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、AQP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、AQP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Aquaporin 1/AQP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Aquaporin 1/AQP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、AQP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Aquaporin 1/AQP1の機能に不可欠なAQP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、AQP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Aquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、AQP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Aquaporin 1/AQP1 HDRプラスミド（h）および Aquaporin 1/AQP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAQP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAQP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。