APOBEC3B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401700-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APOBEC3BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APOBEC3B (h) e o Plasmídeo Double Nickase APOBEC3B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APOBEC3B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APOBEC3B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APOBEC3B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOBEC3B (subunidade catalítica 3B da enzima de edição de mRNA da apolipoproteína B) é uma desaminase de citidina de DNA de fita simples que converte citosina em uracilo durante a replicação e o reparo do DNA, gerando assinaturas mutacionais características C→T/G. Atua na defesa antiviral intrínseca e se conecta às respostas ao estresse de replicação, à sinalização de dano ao DNA e a processos de reparo mutagênico que moldam a estabilidade do genoma. A atividade desregulada de APOBEC3B tem sido associada a cargas elevadas de mutações somáticas e à evolução tumoral em diversos tipos de câncer, tornando-a um fator-chave em estudos de mutagênese, diversificação clonal e vias de manutenção do genoma. Pesquisadores comumente investigam a APOBEC3B no contexto da imunidade inata regulada por interferon, do metabolismo de ácidos nucleicos e de mecanismos que acoplam a exposição de ssDNA associada à replicação à atividade de edição.
APOBEC3B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APOBEC3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APOBEC3B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APOBEC3B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APOBEC3B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.