Apelin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401548
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Apelin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Apelin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Apelin Anticorpo (2A1-2D5): sc-293441
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Apelin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401548 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
APLN codifica a apelina, um ligante peptídico secretado do receptor APJ (APLNR) que regula a homeostase cardiovascular, a angiogênese, o equilíbrio de fluidos e a sinalização metabólica. A interação apelina–APJ ativa vias mediadas por GPCR, incluindo PI3K/AKT, ERK/MAPK e AMPK, modulando a migração endotelial, o tônus vascular e a utilização de energia celular. Em tecidos humanos, a expressão de apelina responde à hipóxia e a sinais inflamatórios e é frequentemente estudada no contexto do remodelamento vascular e da biologia do tecido adiposo. A desregulação da sinalização de APLN tem sido associada a fenótipos cardiometabólicos, disfunção vascular pulmonar e sistêmica e a processos do microambiente tumoral, como a neovascularização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Apelin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene APLN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do APLN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do APLN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Apelin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de APLN para a investigação da sinalização de Apelin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) APLN críticos para a função Apelin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos APLN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Apelin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Apelin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus APLN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Apelin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Apelin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia APLN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo APLN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.