Plasmide Double Nickase (h) APC2: sc-408180-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) APC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide APC2 Double Nickase (h) et le plasmide APC2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) APC2 | sc-408180-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) APC2 | sc-408180-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APC2 code pour l’adénomateuse polypose coli 2, une protéine d’échafaudage du cytosquelette et de la signalisation qui contribue à la régulation de la voie Wnt/β-caténine en favorisant le renouvellement (turnover) de la β-caténine et en contrôlant les sorties transcriptionnelles liées au destin cellulaire et à la prolifération. APC2 participe également à la dynamique des microtubules, à la polarisation neuronale et à la migration cellulaire via des interactions avec des protéines associées à l’actine et aux microtubules, contribuant ainsi au maintien d’une architecture tissulaire coordonnée. La perturbation ou l’expression altérée des membres de la famille APC est associée à une signalisation Wnt déréglée, à l’instabilité chromosomique et à des programmes de différenciation aberrants, faisant d’APC2 une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle de cette voie dans des modèles de développement et de maladie.
APC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.