APC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419146-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APC (m) e o Plasmídeo Double Nickase APC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Apc. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:APC Anticorpo (F-3): sc-9998
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APC Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Apc de camundongo codifica o supressor tumoral APC, um andaime multifuncional que restringe a sinalização canônica Wnt/β-catenina ao promover a degradação da β-catenina por meio do complexo de destruição com AXIN, GSK3β e CK1. Além da regulação de Wnt, a APC contribui para a organização do citoesqueleto, a polaridade celular e a dinâmica dos microtúbulos, influenciando processos como a progressão mitótica e a migração direcional. A perturbação da sinalização dependente de APC e do controle do citoesqueleto está fortemente associada à proliferação aberrante e a defeitos na homeostase intestinal em sistemas modelo, tornando o Apc um nó central para estudar vias que acoplam programas transcricionais à arquitetura tecidual. Essas características posicionam o Apc como um importante determinante genético para investigar os desfechos da via Wnt, a diferenciação epitelial e relações genótipo–fenótipo em células de camundongo.
APC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Apc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Apc. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Apc. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Apc interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.