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ANP32B Double Nickaseプラスミド (h) | sc-417840-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANP32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32 family member B)は、クロマチン関連過程、転写制御、細胞周期制御に関与するとされる、保存性の高い核内リン酸化タンパク質です。ANP32ファミリーの一員として、ANP32Bはタンパク質ホスファターゼの調節、アポトーシス関連シグナル伝達、ならびに細胞ストレス応答に影響するRNA関連の核内機能に寄与します。ANP32B活性の攪乱は、複数のがん関連の状況で観察される増殖能の変化や遺伝子発現プログラムの破綻と関連づけられています。これらの特徴により、ANP32Bはヒト細胞モデルにおける核内シグナル伝達ネットワーク、クロマチンダイナミクス、そして細胞運命決定の規定因子を研究するための有用な標的となります。
ANP32B ダブルニカースプラスミド(h)は、human 細胞株における ANP32B 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ANP32B内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合(NHEJ)によって修復され、その結果、ANP32Bの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ANP32Bが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。